Разработка in vitro технологии для элиминации вируса кустистой карликовости малины

Abstract

Вирус кустистой карликовости малины (Raspberry bushy dwarf virus) (RBDV) — один из наиболее распространенных и вредоносных патогенов малины, значительно снижающий урожайность этой культуры и качество ягодной продукции. Проведено сравнение эффективности различных способов оздоровления растений малины сорта «Малиновая гряда» от вируса RBDV в условиях in vitro. Для элиминации вируса RBDV были испытаны термотерапия, химиотерапия и криотерапия, а также сочетание этих методов. Термотерапию асептических растений проводили в термокамере при переменных температурах (16 ч, 38°С, освещенность 25 μмол•м-2•с-1; 8 ч, 24–26°С, темнота) в течение двух недель. Химиотерапия заключалась в культивировании растений in vitro в течение 4 недель на среде Мурасиге–Скуга с добавлением 30 мг/л противовирусного препарата рибавирина. Для криотерапии апикальных меристем использовали метод PVS2-витрификации. Тестирование растений in vitro на наличие вирусов проводили методом мультиплекс TaqManреал-тайм ПЦР. Установлено, что проведенные по отдельности термотерапия и химиотерапия, а также сочетание этих обработок с криотерапией не приводили к элиминации вируса RBDV. Только в случае применения химиотерапии в сочетании с термотерапией у 37,5 % растений in vitro вирус не обнаруживался. Наиболее высокий выход освобожденных от вируса RBDV растений был получен при использовании комбинированного способа: химиотерапия + термотерапия + криотерапия, при этом у 66,7 % растений сорта «Малиновая гряда» подтвердилась элиминация от вируса RBDV.